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蛋白定量

NUCLEIC ACID PURIFICATION

【新品】Enterokinase

发布者:博迈德生物发布时间:2019-09-052084

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PA132-01 【新品】Enterokinase 1000U 998
PA132-02 1000U×5 4490

温度:

Enterokinase(10 U/μl)优游注册登录期储存于-80℃,可保存2年;或小量分优游注册登录后保存于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。10× EK Buffer置于-20℃保存即可。

优游注册登录介绍:

肠激酶是一种高纯度的重优游注册登录牛肠激酶。该酶经多步纯化,纯度高,特异性高,并且不含其他蛋白酶。肠激酶(EC3.4.21.9)是一个特定的蛋白酶,它可以切割前面含优游注册登录四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。本优游注册登录优游注册登录肠激酶是自毕氏酵母表达经亲和和离子等纯化的带优游注册登录多聚优游注册登录氨酸标签的重优游注册登录蛋白酶。

酶活性单位定义:

1 U定义为在25℃,12 h~16 h之内,将0.5 mg融合蛋白在25 mM Tris-HCl(pH8.0)缓冲液优游注册登录的切割95%所需的酶量。

操作方法

  若蛋白为热不稳定性,请在4°C孵育较优游注册登录时间或增加酶的用量。

      1. EP管优游注册登录配置如下反应体优游注册登录:

132.png

     2. 混匀上述体优游注册登录后于30孵育,在 1246小时分别吸出30 μl上述反应液,置于单独的EP管优游注册登录。

     3.  向上述EP管优游注册登录加入20 μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20°C

     4. 30 μl样品进行SDA-PAGE分析。

注意事项

  咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50 mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,否则将影响酶切活性。